多重ddPCR技术用于肿瘤多位点突变的检测-生物治疗技术和基因工程药物项目成果-科技成果转化服务平台

多重ddPCR技术用于肿瘤多位点突变的检测

2024-02-04

技术领域： 生物治疗技术和基因工程药物

应用领域：医院

发展阶段：量产

转化方式： 技术转让、技术入股、技术服务、合作开发

专利情况： 发明专利2个

技术标签：

ddPCR,肿瘤检测

项目负责人： 陈雯雯

成果简介

成果简介

对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的检测对指导肿瘤患者精准靶向用药和预后判断至关重要。本项目通过两重ddPCR成功实现在两管内对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的14种热点突变进行定性检测。方法检测灵敏度高，能够检测出低至0.01%丰度的突变靶标。在30例临床样本的检测中，各个靶标的检测结果与直接测序法的一致性均达到100%。并进一步通过增加荧光通道数量，构建四通道ddPCR实现不同点突变的分型与定量。定量结果与预期具有良好的一致性，R²均达到0.999以上，定量检测限均低至1 copies/μl。在对7例KRAS突变型的临床样本检测中，成功实现突变型的再分类与定量检测，并且通过拷贝数的计算确定样本突变率。
总的来说，与现有的直接测序法相比，本研究具有以下优势：（1）方法检测灵敏度高，能够检测丰度为0.01%的突变。（2）单管反应能够检测的靶标重数多，能够实现4种/3种不同靶标的同时检测，样本消耗低。（3）检测时间短，整个检测流程所需时间小于5小时，而直接测序法所需时间大于24小时。（4）与现有的利用ARMS-PCR法的商用试剂盒相比，本研究能检测到野生型探针覆盖到的未知突变，并能实现突变位点的分型与定量分析，这是ARMS-PCR所无法实现的。因此，多重ddPCR是一种在肿瘤多位点突变检测中具有很大应用潜力的方法。

技术水平

标准化评价

技术成熟度：系统级

技术创新度：第二级

技术先进度：第三级（标准引领）

结果综述

综合来看，当前成果项目整体细分等级达到“技术产业化阶段E+”级，从技术可行性角度来说属于“风险等级：中低；价值潜力：中等”的成果项目。

技术优势

知产信息

一种检测KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的引物探针组合及其应用	CN114934105A	发明专利	查看
一种定量检测KRAS基因突变的引物探针组合及其应用	CN116042818A	发明专利	查看

应用前景

应用前景：

可广泛应用于KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因突变的检测，适用于肺癌、结直肠癌、黑色素瘤等多种恶性肿瘤的突变检测。

风险预期

政策风险

无政策风险

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